Categorie: Experimenteel

T.A.R. van Merrienboer¹, K.B. Rombouts^{2, 1}, J.P. Meekel³, W. Wisselink¹, N. Bogunovic^{1, 2}, K.K. Yeung^{1, 2}

¹VU medisch centrum, AMSTERDAM, Vaatchirurgie
²VU medisch centrum, AMSTERDAM, Fysiologie
³Zaans Medisch Centrum, ZAANDAM, Heelkunde

Introductie

Er bestaat een negatief verband tussen diabetes mellitus (DM) en abdominale aorta aneurysmata (AAA), welke mogelijk is veroorzaakt door Metformine gebruik. Wij onderzoeken het therapeutische effect van Metformine op de gen- en eiwit expressie in patiënt-eigen gladde spiercellen gekweekt uit aneurysma weefsel.

Methode

Gladde spiercellen van gezonde controles (n=3) en van AAA-patiënten (n=3) zonder DM zijn gekweekt op dekglaasjes en op 3D constructies. De gladde spiercellen zijn behandeld met: 1) 10 mM glucose om DM- patiënten na te bootsen zonder medicatie, 2) met 10 mM glucose + 10 mM Metformine, 3) met alleen 10 mM Metformine en 4) onbehandelde gladde spiercellen. Tevens is er gevarieerd in doses 2, 5, 10 mM glucose en Metformine. Na één week is RNA geïsoleerd en zijn monsters gefixeerd voor immunofluorescentiekleuring. De expressie van een selectie genen en eiwitten, die een rol spelen binnen AAA-ontwikkeling, zijn onderzocht.

Resultaten

Toevoeging van glucose aan beide groepen gladde spiercellen liet een verhoogde celproliferatie zien. Metformine verminderde de celproliferatie (Ki67) in de controle groep, maar niet in de AAA-groep. Metformine verlaagde in de AAA-groep de genexpressie van inflammatoire markers (IL6 en MCP1) en pro-apoptotische markers (TP53). In zowel de controle als AAA-groep verhoogde Metformine de eiwitexpressie of AIM2, welke een onderdeel is van het inflammasoom. Metformine beïnvloedde de extracellulaire matrix formatie van de gladde spiercellen bij zowel controles als AAA-patiënten, welke zichtbaar is aan de vezelrichting van actine en de fibriline-1 expressie. Bovenstaande effecten waren tevens onderhevig aan de dosering van Metformine.

Conclusie

Behandeling met Metformine kan een gunstig effect hebben op gladde spiercellen van AAA-patiënten door inflammatie en celdood te voorkomen. Wij zullen de aantallen vergroten en de onderzoeksgroepen aanvullen om verder het exacte mechanisme te specificeren en therapeutische doelen van Metformine in AAA vast te stellen.